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CAT活性定量を用いたCAT合成量定量法の原理
クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)はクロラムフェニコール(Cm)にアセチルコエンザイムA (AcCoA)のアセチル基を転移する酵素です。この反応の結果生じたHS-CoAの量よりCATタンパク質の活性を定量します。HS-CoAはエルマン試薬(Ellman’s reagent, DTNB)を用いて発色定量します。(参考文献1)
Quick
SI
1000 倍
5000 倍
30 min
3 μL
400 μL
1 cm
13,600 cm-1 M-1
(参考文献1)
150 U/μg
計算式
CAT [μg/mL reaction mix] = (A412 − A412 blk) × 1000 × 1000 / ε412 / L / T / α / S × V × D
計算シート
(参考文献1)W. V. Shaw. (1975), Methods Enzymol., 43, 737-755
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